泛素結合酶E2蛋白A抗體

1、制備抗原。

2、選擇實驗動物。

3、動物免疫。

4、試取血進行測試，看看是否成功免疫。

5、如果成功免疫，殺死實驗動物，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對異種動物而言，是良好的抗原物質?？梢源碳ぎ惙N動物產生抗 Ig 血清，

經(jīng)適當提取后，產生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體。在多數(shù)的間接標記反應中，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實驗動物 兔

4．其它材料及試劑

The ubiquitin (Ub) pathway involves three sequential enzymatic steps that facilitate the conjugation of Ub and Ub-like molecules to specific protein substrates.

抗突觸前膜受體抗體(PsmRAb)ELISA試劑盒

靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA試劑盒

窖蛋白2(CAV2)ELISA試劑盒

假尿苷酸合酶7(PUS7)ELISA試劑盒

釋放酶14(KLK14)ELISA試劑盒

泛素結合酶E2蛋白A抗體肌糖ε(SGCε)ELISA試劑盒

肌腱蛋白M(TNM)ELISA試劑盒

紅細胞補體受體1(CR1)ELISA試劑盒

核酸外切酶1(EXO1)ELISA試劑盒

含CUB域蛋白1(CDCP1)ELISA試劑盒

骨成型蛋白3(BMP3)ELISA試劑盒

高爾基體蛋白A7(GOLGA7)ELISA試劑盒

甘油酸激酶(GLYCTK)ELISA試劑盒

鈣結合蛋白3(CALB3)ELISA試劑盒

分揀連接蛋白8(SNX8)ELISA試劑盒

防御素α3(DEFα3)ELISA試劑盒

二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)ELISA試劑盒

多巴胺受體D1(DRD1)ELISA試劑盒

1.特異性——免疫原

用于產生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對靶蛋白的特異性。選擇針對不合適或質量差的免疫原產生的抗體將導致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結果。應注意選擇針對已充分表征的免疫原產生的抗體。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質的類似三級結構。此外，除非在合成過程中添加到肽中，否則它們不會表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此，使用肽產生的抗體可用作蛋白質印跡的有用試劑，因為由于樣品處理過程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位。當抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質時，肽也可用作免疫原。在這些情況下，產生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性。

3.天然蛋白質

如果將純化的蛋白質用作免疫原，則針對它們產生的抗體可能無法識別蛋白質印跡中變性蛋白質的線性表位。一些使用天然蛋白質產生的抗體只能識別蛋白質表面的天然氧化構象表位。對于單克隆抗體尤其如此。